NIBSC97/642百日咳博德氏桿菌抗血清（小鼠）1RR 標(biāo)準(zhǔn)品的使用

NIBSC97/642百日咳博德氏桿菌抗血清（小鼠）1RR 標(biāo)準(zhǔn)品的使用方法：出于實(shí)際目的，每個(gè)小瓶含有相同數(shù)量的抗血清。每個(gè)小瓶的全部?jī)?nèi)容物應(yīng)完全溶解在0.5ml蒸餾水中，并在使用前保持溶液冷卻（例如+4°C）。建議將溶液儲(chǔ)存在-20°C或更低的溫度下，不要立即使用。應(yīng)避免反復(fù)冷凍和解凍。

NIBSC97/642百日咳博德氏桿菌抗血清（小鼠）1RR 標(biāo)準(zhǔn)品的小瓶不含抑菌劑，制劑不應(yīng)假定為無菌。不應(yīng)試圖稱量冷凍干燥粉末的比例。在NIBSC使用FDA報(bào)告的用于制備美國(guó)批次1的方法制備小鼠抗血清，不同的是使用5-8周齡的NIH小鼠代替FDA使用的CD-1菌株進(jìn)行免疫。用于免疫的DTaP疫苗由Pasteur Merieux Connaught（加拿大）捐贈(zèng)，據(jù)報(bào)道含有10微克/0.5毫升戊二醛滅活百日咳毒素（PT）、5微克/0.5 ml絲狀血凝素（FHA）、3微克/0.5 l百日咳肌動(dòng)蛋白（PRN）、5毫克/0.5毫升菌毛混合物（Fims，2型和3型）、，15Lf破傷風(fēng)類毒素和15Lf白喉類毒素以及1.5mg AlPO3作為佐劑。用0.5ml 1:10的疫苗在0.85%NaCl中的稀釋液在三周內(nèi)腹腔內(nèi)免疫小鼠三次。第三次免疫三周后，動(dòng)物終末放血，合并血清樣本。免疫球蛋白通過硫酸銨沉淀部分純化，再溶解并用0.01M磷酸鹽緩沖鹽水（PBS）透析，pH7.4。PBS中的免疫球蛋白溶液在PBS中10%正常小鼠血清中稀釋1:10。將0.5ml等分溶液分配到玻璃瓶中，編號(hào)為97/642，在真空下冷凍干燥，密封并在-20°C的黑暗中儲(chǔ)存。

對(duì)于ELISA平板上的初始稀釋，建議將該溶液稀釋1/50-1/100。然而，這可能因個(gè)別實(shí)驗(yàn)室而異。

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